分光光度計是一種常用的光學儀器,它采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源。光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。通過使用分光光度計,我們可以得到樣品的光譜信息,了解其吸收或透射特性,從而進行定性和定量分析。
分光光度計的校驗是確保其準確性和可靠性的重要步驟。以下是一些常見的分光光度計校驗方法:
1、波長準確度的檢驗:
分光光度計在使用過程中,由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因,經常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導致儀器靈明度降低,影響測定結果的精度,需要進行檢驗。
使用標準溶液,測量其在不同波長下的吸光度,并與已知波長下的吸光度進行比較。如果存在差異,則需要調整儀器的波長設置,使其與真實的波長相匹配。
2、零點校準:
將沒有樣品的純溶劑或空白溶液放入樣品池中,調節(jié)儀器的零點位置,使其讀數(shù)為零。這可以消除系統(tǒng)漂移或背景噪音對測量結果的影響。
3、穩(wěn)定度的檢驗:
在零點不受光的條件下,用零點調節(jié)器將儀器調至零點,觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,調節(jié)零點后,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,調節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩(wěn)定性。
4、光的檢驗:
可見分光計棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應波長下的雜散輻射率。
5、透射比正確度的檢驗:
用透射比標準值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。
6、線性校準:
使用標準溶液或標準樣品進行線性校準。通過測量不同濃度的標準溶液或樣品,繪制吸光度與濃度之間的標準曲線。根據(jù)該曲線進行樣品的定量分析,并驗證儀器的線性范圍和靈敏度。
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